定性测定糖的方法都有哪些

定性测定糖的方法都有哪些
2025-12-25 06:01:02
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回答1:

【实验原理】
本实验采用蒽酮比色法测定可溶性糖的含量.糖在硫酸作用下生成糠醛,糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物,颜色的深浅与糖含量有关.在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比.由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化,故必须在反应后立即在同一时间内比色.该实验方法简便,但没有专一性,绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮试剂反应,产生颜色.
【器材与试剂】
1. 实验仪器分光光度计,恒温水浴,电子天平,烘箱,刻度试管,漏斗
2. 实验试剂活性炭,乙醇
葡萄糖标准液:称取已在80℃烘箱中烘至恒重的葡萄糖100
mg,用80%乙醇配制成1000 ml溶液,即得每ml含糖为100
μg的标准液
蒽酮试剂:称取1 g
蒽酮,溶解于1000 ml稀硫酸(将760 ml相对密度为1.84的浓硫酸用蒸馏水稀释成1000
ml)溶液中,置于棕色瓶中,当日配置使用.
3. 实验材料植物叶片或种子
【实验步骤】
1.
可溶性糖的提取
植物叶片或种子在110℃烘箱烘15
min,然后调至70℃过夜.干叶片磨碎后称取50 mg样品倒入10
ml刻度离心管内加入4 ml 80%乙醇,置于80℃水浴中不断搅拌40
min,离心,收集上清液,其残渣加2 ml 80%乙醇重复提2次,合并上清液.在上清液中加10
mg活性炭,80℃脱色30 min,80%乙醇定容至10
ml,过滤后取滤液测定.
2.
绘制标准曲线
取20 ml带塞试管,编号,按下表配置系列浓度的标准葡萄糖溶液.然后在每只试管中加入5
ml蒽酮试剂,混匀,盖上塞子,在沸水浴中煮沸10
min(水浴重沸后计时),取出,立即用水冷却至室温,在625nm波长下,分别测量各管的光密度值,用0号管调零.以光密度为纵坐标,葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线.